ІНФОРМАЦІЯ

про медико- біологічне нововведення, яке рекомендується для впровадження

Шифр і назва НДР та строки виконання: А.98.01- "Вивчити частоту виділення та біологічні особливості L-форм мікобактерій туберкульозу у хворих на хронічний деструктивний туберкульоз легень".
Строки виконання: 01.1998 - 12.2000 р.

Назва наукової рекомендації: Живильне середовище для виділення L-форм мікобактерій туберкульозу із патологічного матеріалу хворих на туберкульоз

Анотація. При застосуванні загальноприйнятих методик виявлення мікобактерій туберкульозу (МБТ)- бактеріоскопії і посіву на МБТ - збудника туберкульозу не завжди можливо виявити. Під впливом антибактеріальної терапії, яка застосовується для лікування туберкульозного процесу, типові  бактеріальні форми МБТ швидко перестають виділятися. Доведено, що вони зазнають L-трансформації, втрачаючи бактеріальну стінку частково або ж цілком. Такі біологічно змінені форми називають L-формами. В зв’язку з біологічними особливостями L-форм, для яких характерні різко змінена морфологія бактеріальних клітин та знижений метаболізм, виділення їх потребує застосування спеціальних методів культивування і ідентифікації. L-форми характеризуються підвищеною крихкістю і потребують щадящих методів обробки патологічного матеріалу, елективні живильні середовища, присутність нативних білків та осмотичних стабілізаторів. 	Для культивування L-форм МБТ загальноприйнятим є напіврідке живильне середовище Дорожкової. Однак дане середовище має суттєві недоліки: 
	- значна тривалість дослідження по виділенню L-форм МБТ на цьому середовищі, яка становить від 3-х тижнів до 2,5 - 3-х місяців;
	- до складу його сольового розчину входить дуже дорогий компонент L-аспарагін.
Тому для впровадження пропонується удосконалене живильне середовище, в якому шляхом внесення глутамінату натрю до складу сольового розчину середовища досягаться скорочення на 3-7 днв термнв видлення L-форм МБТ із харкотиння хворих на туберкульоз легень через полпшення ростових властивостей пропонованого середовища, оскільки глутамінат натрю являться допомжним джерелом азотистого харчування для МБТ, та шляхом замни дорогого L-аспарагіну на значно дешевший глікокол досягаться здешевлення дослідження по виділенню L-форм.
Живильне середовище готують наступним чином. Для приготування 1 л сольового розчину середовища по пропису (г/л води) беруть: 
калй фосфорнокислий одноосновний - 1,5
натрй фосфорнокислий двоосновний - 2,5
магнй срчанокислий - 0,5
натрй лимоннокислий ( середнй ) - 1,5
залзо лимоннокислоамачне - 0,05
глкокол - 2,0
натрй глутамновокислий одноосновний - 10,0
глцерин - 30 мл
вода дистильована - до 1 л
Сол у вказаному вище порядку додають в пдгрту дистильовану воду, кожний нгреднт псля того, як розчинився попереднй. Середовище фльтрують крзь паперовий фльтр, додають 0,3 % агар-агару, розливають в колби по 700 мл та стерилзують в автоклав при 1 атмосфер ( 120 0С) протягом 30 хв. За клька днв до посву середовище розгрвають на водянй бан до температури 40-45 0С, псля чого додають стерильний розчин сахарози ( на 100 мл дистильовано води 200 г сахарози, стерилзаця в автоклав при 0,5 атм 20 хв.) та 100 мл сироватки велико рогато худоби або конячо сироватки. Вмст колби розливають в стерильн пробрки по 4,5 мл  перевряють на стерильнсть протягом двох дб. Таким чином, кожна пробрка перед посвом мстить напврдке живильне середовище з 20% сахарози  10% сироватки.
Посв на це середовище здйснюють вдповдно до методичних рекомендацй: Выделение L-форм микобактерий туберкулеза из патологического материала: Метод. рекомендации / Под ред. И.Р.Дорожковой,З.Н.Кочемасовой, М.М.Дыхно.- М.: Б.И., 1984.- 19 с.
Показання для застосування: припинення бактеріовиділення типових МБТ у хворих на туберкульоз легень, у яких збереглись рентгенологчн та клнчн ознаки активност туберкульозного процесу.
Практична значимість: прискорення на 3- 7 днів термінів виділення L-форм МБТ  та здешевлення дослідження по виділенню L-форм МБТ із патологічного матеріалу хворих на туберкульоз, що, в свою чергу, сприяє прискоренню та здешевленню мікробіологічної діагностики туберкульозу.

Нововведення апробовано в лабораторії мікробіології Інституту фтизіатрії  і пульмонології ім. Ф.Г.Яновського АМН України.
На розгляд Інституту промислової власності подана заявка на винахід: “Живильне середовище для виділення L-форм мікобактерій туберкульозу”, № 99126652 від 7.12.99 р., ршення про видачу патенту вд 29.06.2000 р.

Перелік необхідного обладнання: термостат, автоклав, сухожарова  шафа, ваги торсійні, мікроскоп з приставкою для фазово-контрастної мікроскопії.

Послуги розробників для оволодіння нововведенням: інформаційний лист "Спосіб виявлення персистенції мікобактерій туберкульозу".-Київ, 2000; курси інформації і стажування.

Установа - розробник, адреса і реквізити: Інститут фтизіатрії і пульмонології ім. Ф.Г.Яновського АМН України (ІФП), 03680, м. Київ-110, узвіз Протасів яр, 7, тел.(044)277 54 88, факс (044) 277 21 18.

Прізвища, ім’я та по батькові авторів-розробників, контактний телефон, вдповдальний за впровадження:
Чернушенко Катерина Федорвна, Журило Олександр Анатолійович, Клименко Мирослава Терентвна, Барбова Ганна ванвна, Циганкова Людмила Михайлвна, Ясир Свтлана Григорвна, В’ялих Жанна Едуардвна
Відповідальний за впровадження: Клименко Мирослава Терентіївна т.(044)2775511

Висновок Вченої ради Інституту (теоретична і практична значимість
 нововведення, шляхи і обсяги впровадження).

Нововведення є результатом виконання науково-дослідної роботи і має велике практичне значення, яке полягає у модифікації відомого живильного середовища Дорожкової для виділення L-форм МБТ з патологічного матеріалу хворих на туберкульоз. Впровадженням запропонованого живильного середовища, в якому шляхом внесення до складу сольового розчину середовища глутамінату натрію, який є допоміжним джерелом азотистого харчування для МБТ, досягається поліпшення ростових властивостей середовища, і тим самим скорочення термінів дослдження по виділенню L- форм МБТ на 3-7 днів. А введення глікоколу як основного компоненту азотистого харчування МБТ замість дорогого аспарагіну дозволяє значно здешевити дослідження і зробити його доступним в будь-якому протитуберкульозному закладі. Все це, в свою чергу, сприяє прискоренню та здешевленню мікробіологічної дагностики туберкульозу.
Результати роботи можуть бути впроваджені шляхом проведення курсів інформації та стажування, публікацій в наукових журналах.
Нововведення рекомендовано до застосування в протитуберкульозних закладах України. 
Дана розробка грифу секретності не має.

Директор Інституту фтизіатрії і пульмонології
ім. Ф.Г. Яновського АМН України,
академік АМН України, професор					Ю.І.Фещенко

Керівник  теми - зав. лабораторією імунології
 Інституту фтизіатрії і пульмонології
 ім. Ф.Г.Яновського АМН України, 
член-кор. АМН України, професор				К.Ф.Чернушенко

2000.10.02.